| 產品名稱 | 
      WPMY-1 | 
    
    
      | 商品貨號 | 
      MZ-0265 | 
    
      
      | 中文名稱 | 
      人正常前列腺基質永生化細胞 | 
    
      
      | 細胞數量 | 
      1*10^6 | 
    
      
      | 組織來源 | 
      前列腺基質;SV40轉化;男性 | 
    
      
      | 細胞種屬 | 
      Homo sapiens, human | 
    
      
      | 細胞污染 | 
      HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。 | 
    
      
      | 生長特性 | 
      adherent | 
    
      
      | 培養基 | 
      DMEM+5% FBS+1% P/S | 
    
      
      | 形態特征 | 
      myofibroblast | 
    
      
      | 傳代方法 | 
      myofibroblast | 
    
      
      | 細胞描述 | 
      肌成纖維基質細胞株,WPMY-1,與RWPE-1cells(ATCCCRL-11609)一樣,來源于同一張成人前列腺組織切片的周圍區域的基質細胞。通過一個pRSTV質料結構,用SV40大T抗原對基質細胞進行永生化。WPMY-1細胞,與RWPE-1細胞及其它上皮細胞衍生株一樣,屬于來源于同一個前列腺的一系列細胞株。由于它們來源于同一個前列腺的周圍區域,WPMY-1細胞株對于研究分泌和基質與上皮細胞相互作用尤其有用。 | 
    
      
      | 細胞傳代步驟 | 
      如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1.	棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2.	加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3.	按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4.	將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中 | 
    
      
      | 復蘇細胞步驟 | 
      將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。 | 
    
      
      | 細胞凍存步驟 | 
      :待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml完全培養基終止消化,可使用血球計數板計數。2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 | 
    
      
      | 細胞凍存 | 
      Freeze medium: 50% basal medium+40% FBS+10%.DMSOStorage temperature: liquid nitrogen vapor phase | 
    
      
      | 細胞運輸 | 
      干冰運輸(2ml凍存管)或活細胞運輸(T25細胞瓶) |